TTC染色观察梗死区呈苍白色实验报告-上海郑核
一、实验器材及试剂
1、实验器材
名称 厂家 型号
恒温水浴锅 姜堰市无力医疗器械厂有限公司 TL-42OD
标本瓶 Servicebio
徕卡刀片 上海徕卡仪器有限公司 LEICA 819
解剖镊
照相机 佳能
2、主要实验试剂
试剂名称 厂家 货号
TTC染液 Servicebio G1017
固定液 Servicebio G1101
二、新鲜组织切片制备及染色实验步骤
1、取材:动物麻醉后立即取新鲜组织(如脑、心脏),不经固定液固定,将组织直接放入-20℃
速冻20-30min,如果不急用,可以暂时放置-80℃冻存。
2、组织块切片:将冻好的组织稍解冻,用莱卡刀片手动切片,厚度2-3mm为宜,切面整齐。
3、TTC染色:将切片放入提前预热好的的TTC孵育液中,放入37℃水浴锅中避光孵育
15-30min,间隔5-8min轻轻摇动组织,使其均匀接触到染色液,并观察染色结果。
4、拍照:组织成色后,加入固定液终止反应,并避光保存组织,照相机拍照。
三、染色判读:
组织正常区呈红色,梗死区呈苍白色。
四、注意事项:
1、标本越新鲜越好,勿固定,刀片宜薄而锋利,在冰箱中速冻的时间以能顺利切片为宜,
保持切片平整。
2、染色后的标本浸存于固定液中避光保存,染色结果能保存数月,在阳光下易褪色;
3、TTC染色液避光4℃可保存一个月,使用前先复常温。
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